本发明公开了一种AFP和GM-CSF双基因共表达重组载体,其沿载体转录方向依次连接有AFP基因、IRES序列和GM-CSF基因,或者沿载体转录方向依次连接有GM-CSF基因、IRES序列和AFP基因;所述AFP基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述GM-CSF基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示,所述IRES序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示。本发明所述的双基因共表达重组载体,采用IRES序列来连接AFP基因和GM-CSF基因,能够在同一载体中同时表达甲胎蛋白以及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,该重组载体可用于肝癌的基因免疫治疗,既能发挥细胞因子的免疫调节作用,又能靶向性地针对肝癌产生特异性抗肿瘤效应。