本发明公开了一种基于香豆素席夫碱铜离子配合物硫醇荧光探针及其制备方法和应用，其中以香豆酰肼和2,6‑吡啶二甲醛为原料合成了一种香豆素类席夫碱衍生物(化合物1)，化合物1在与铜离子配位后形成了席夫碱结构的香豆素类‑铜离子配合物,即为(化合物1‑Cu2+)。该探针由于Cu2+的顺磁性及螯合作用的影响，使化合物1荧光淬灭。当加入巯基氨基酸后，化合物1‑Cu2+荧光增强。而其它非巯基氨基酸几乎不影响。紫外可见光谱吸收和荧光光谱表明化合物1‑Cu2+在CH3CN:HEPES(3:2,v/v)溶液中对含有巯基的氨基酸具有良好的选择性和灵敏性。本发明成功用于人子宫颈鳞癌细胞中，进行了检测谷胱甘肽的细胞成像实验。有望用于生物体内硫醇化合物的检测。

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