本发明公开了一种凝血因子Ⅷ亲和层析树脂的制备方法。首先称取保存的琼脂糖凝胶进行洗涤处理，然后采用环氧氯丙烷活化法进行活化凝胶，得到活化凝胶；将得到的活化凝胶与间隔臂分子N‑羟基琥珀酰亚胺进行手臂连接反应，得到手臂连接的凝胶；将得到手臂连接的凝胶与肽配基进行配基偶联反应；偶联反应所得产物进行处理反应得到凝血因子Ⅷ亲和层析树脂；所得树脂进行洗涤处理，最后于凝胶体积3倍的20％乙醇溶液中在4℃条件下存放。将本发明产品层析树脂用于从血浆中提取凝血因子Ⅷ，能够快速、特异、高效的纯化凝血因子Ⅷ。

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