本发明公开了一种人类和其他哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用,属于基因工程与基因治疗技术领域。该附着体表达载体上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β‑干扰素MAR序列(或者与该序列95%以上同源的核苷酸序列),相较包含全长MAR序列或387bp MAR序列的表达载体,该载体能高效、持续、稳定地表达外源目的基因,尤其是包含E段MAR序列的载体表达最佳,可用于基因治疗。在该载体中,分段MAR序列插入载体的多克隆位点也即eGFP下游处,一方面能克服转基因沉默,另一方面能提高目的蛋白的表达水平以及后续单克隆细胞株筛选的有效性。